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看聲光可調(diào)諧濾波器(AOTF)如何增強共聚焦顯微鏡的多功能性

更新時間:2023-12-05 點擊次數(shù):1072

看聲光可調(diào)諧濾波器(AOTF)如何增強共聚焦顯微鏡的多功能性


聲光可調(diào)諧濾波器(AOTF)可以為共聚焦顯微鏡提供更加清晰的圖像、逐像素波長的靈敏性以及精確的控制。Gooch & Housego(G&H)的生命科學(xué)部門副總裁Lars Sandstr?m探討了聲光可調(diào)諧濾波將來的技術(shù)發(fā)展,以及如何進一步增強共聚焦顯微鏡在生命科學(xué)領(lǐng)域的多功能性。


共聚焦顯微鏡,也稱為共聚焦激光掃描顯微鏡(CLSM),在生命科學(xué)領(lǐng)域已經(jīng)應(yīng)用了數(shù)十年。從眼科到神經(jīng)科學(xué),共聚焦顯微鏡支持拯救生命相關(guān)的診斷、治療和研究。


如今,共聚焦顯微鏡的生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用越來越依賴于聲光可調(diào)濾波器(AOTF)。AOTF技術(shù)在精確控制、靈敏性和速度方面均有提升,增強了共聚焦顯微鏡的多功能性,從而進一步實現(xiàn)了科學(xué)創(chuàng)新。隨著對更高圖像清晰度和靈活性的需求增加,AOTF解決方案可能會變得更加復(fù)雜,并需要特定的綜合專業(yè)技術(shù)和功能。


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AOTF在共聚焦顯微鏡中的運用與優(yōu)勢


聲光(AO)器件在共聚焦顯微鏡中有很多運用。您可以在調(diào)制、功率控制、激光切換、激光耦合和分光中找到它們的身影。對于單個掃描頭來說,例如徠卡顯微系統(tǒng)的STELLARIS 8,聲光器件被廣泛運用于其中。在它們之中,AOTF更是明星產(chǎn)品,提供了多種優(yōu)勢,包括:


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徠卡STELLARIS 8 掃描頭


更清晰的圖像


檢查活體組織的一個挑戰(zhàn)是在標本移動或著分子變化/損壞之前,足夠快速地獲取多光譜數(shù)據(jù)。AOTF的多功能性允許分析活細胞,這意味著科學(xué)家們就可以完整而又準確的監(jiān)測動態(tài)細胞過程,而這是基于 AOTF 系統(tǒng)所允許的快速光強與波長切換功能。熒光漂白后恢復(fù)(FRAP)、熒光漂白損失(FLIP)和用戶定義的小標本區(qū)域(感興趣的ROI區(qū)域)等技術(shù)已經(jīng)取得了很大進展。


逐像素波長和功率控制


顯微鏡專家可以保持高掃描速率,同時逐像素調(diào)整圖像。通過為每個波長和激光分配不同的光強來實現(xiàn)不同信號電平的平衡。AOTF的一個用途是選擇特定的激發(fā)波長并設(shè)置白光激光器的功率。此外AOTF還可以與激光多路復(fù)用技術(shù)相結(jié)合。AOTF通過選擇系統(tǒng)中的激光源并控制其強度來控制波長和光強。聲光效應(yīng)允許快速并精確地控制傳輸和波長選擇。這樣AOTF就可用作激發(fā)光的濾波器,并且可以實現(xiàn)“動態(tài)"調(diào)整。這與傳統(tǒng)的介質(zhì)帶通濾波器形成鮮明對比,任何調(diào)整都意味著需要購買新的濾波器,并且顯微鏡中可以安裝的濾波器數(shù)量始終存在限制。


環(huán)境穩(wěn)定性


共聚焦系統(tǒng)中的AOTF實現(xiàn)了對多條激光線路進行靈敏、快速的電子調(diào)諧和強度控制,消除了由溫度或濕度變化引起的任何潛在頻率漂移。而這些對于傳統(tǒng)濾波轉(zhuǎn)臺/輪的機械調(diào)諧方案很難實現(xiàn)。


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AOTF技術(shù)與指標


在AOTF中,射頻驅(qū)動器輸出的頻率作用于壓電換能器(通常是鈮酸鋰),從而產(chǎn)生聲波并耦合到聲光材料中,如二氧化碲(TeO2)。這就產(chǎn)生了一個衍射光柵,其中晶體的折射率隨驅(qū)動器提供頻率的變化而變化。當相干光束穿過晶體時,只有一窄帶的頻率滿足相位匹配條件,并且以未衍射光束不同的角度離開晶體,而這便形成了衍射光斑。晶體的幾何形狀對于獲得所需的性能至關(guān)重要。


大多數(shù)聲光器件都是按標準規(guī)格制造的,G&H是一家行業(yè)內(nèi)領(lǐng)xian的專業(yè)公司,提供廣泛的聲光可調(diào)諧濾波器,覆蓋從紫外到中紅外的波長,帶寬小于1nm。G&H的聲光可調(diào)諧系統(tǒng)包括電子控制、可配置驅(qū)動器,以提高操作人員的靈活性和反饋穩(wěn)定系統(tǒng)。無論工作環(huán)境條件如何,均可以保持波長的穩(wěn)定性。G&H還運用了一項獲得專li的旁瓣抑制技術(shù),以提高頻譜純度。


至關(guān)重要的是,G&H是唯yi一家自己生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)二氧化碲(TeO2)晶體的光學(xué)系統(tǒng)開發(fā)商。這有助于保持一致性和可靠性,從而產(chǎn)生更加一致和可重復(fù)的AOTF產(chǎn)品。這種在G&H的美國工廠(符合ITAR標準)生長,拋光和制造晶體的能力確保了在行業(yè)內(nèi)領(lǐng)xian的地位。


下一代共聚焦顯微鏡的驅(qū)動力


從OEM客戶和zui終用戶對共聚焦顯微鏡發(fā)展方向的反饋表明,多功能性是一個關(guān)鍵的要求。對單一系統(tǒng)內(nèi)更大范圍可調(diào)諧波長的需求正在增長,提供靈敏性,以及更好的使用價值。G&H已經(jīng)可以提供單個濾波器可直接覆蓋400-2400 nm的范圍(而不是通常需要的三個濾波器),并且在實現(xiàn)驅(qū)動的靈敏性方面更進一步。


溫度效應(yīng)的管理是另一個需要進一步創(chuàng)新的領(lǐng)域。AOTF對溫度變化非常敏感。為了克服這個問題,G&H驅(qū)動器的設(shè)計基于一個可以保持溫度的芯片,并且通過一個反饋系統(tǒng)調(diào)整輸出以保持溫度恒定,這個過程稱為波長鎖定。該集成系統(tǒng)還包含晶體結(jié)構(gòu)、序列號等可訪問信息。


為了zui大限度地發(fā)揮AOTF系統(tǒng)的潛力及其對用戶的好處,G&H在顯微鏡系統(tǒng)制造商設(shè)計下一代顯微鏡之初就開始與他們合作。這種協(xié)作方法使制造商能夠提高他們的顯微鏡和超連續(xù)源的性能。


總而言之,經(jīng)驗已經(jīng)證明了采用漸進式而不是革命性的方法來實現(xiàn)AOTF和驅(qū)動系統(tǒng)制造和集成的優(yōu)勢。G&H將與顯微鏡行業(yè)攜手合作,不斷改進AOTF技術(shù),以跟上生命科學(xué)和生物光子學(xué)應(yīng)用的快速發(fā)展步伐。


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